Հակացիկլային ցիտրուլինացված պեպտիդի (CCP) հակամարմինների ELISA հավաքածու

Այս հավաքածուն մարդու շիճուկի նմուշներում հայտնաբերում է հակացիկլիկ ցիտրուլինացված պեպտիդային հակամարմիններ (CCP հակամարմիններ)՝ հիմնվելով անուղղակի մեթոդի վրա, որի դեպքում մաքրված ցիկլիկ ցիտրուլինացված պեպտիդային հակածիններն օգտագործվում են որպես պատող հակածին։

Թեստավորման գործընթացը սկսվում է շիճուկի նմուշը վերոնշյալ մաքրված հակածիններով նախապես պատված ռեակցիոն անցքերի մեջ ավելացնելով, որին հաջորդում է ինկուբացիոն շրջանը: Այս ինկուբացիայի ընթացքում, եթե նմուշում առկա են CCP հակամարմիններ, դրանք կճանաչեն և կկապվեն միկրոանցքերի վրա պատված ցիկլիկ ցիտրուլինացված պեպտիդային հակածինների հետ՝ ձևավորելով կայուն հակածին-հակամարմին համալիրներ: Հետագա քայլերի ճշգրտությունն ապահովելու համար ռեակցիայի անցքերի մեջ չկապված բաղադրիչները հեռացվում են լվացման գործընթացի միջոցով, ինչը օգնում է վերացնել շիճուկի մեջ առկա այլ նյութերի հնարավոր խանգարումը:

Հաջորդը, ֆերմենտային կոնյուգատները ավելացվում են ռեակցիայի անցքերի մեջ: Երկրորդ ինկուբացիայից հետո այս ֆերմենտային կոնյուգատները հատուկ կերպով կկապվեն առկա հակածին-հակամարմին համալիրների հետ՝ ձևավորելով ավելի մեծ իմունային համալիր, որը ներառում է հակածինը, հակամարմինը և ֆերմենտային կոնյուգատը: Երբ TMB սուբստրատի լուծույթը ներմուծվում է համակարգի մեջ, կոնյուգատի մեջ գտնվող ֆերմենտը կատալիզացնում է քիմիական ռեակցիա TMB սուբստրատի հետ, ինչը հանգեցնում է տեսանելի գույնի փոփոխության: Այս գունային ռեակցիայի ինտենսիվությունը ուղղակիորեն կապված է սկզբնական շիճուկի նմուշում առկա CCP հակամարմինների քանակի հետ: Վերջապես, միկրոպլանշետի կարդացիչ է օգտագործվում ռեակցիայի խառնուրդի կլանումը (A արժեք) չափելու համար: Այս կլանման արժեքը վերլուծելով՝ կարելի է ճշգրիտ որոշել նմուշում CCP հակամարմինների մակարդակը՝ ապահովելով հուսալի հիմք համապատասխան կլինիկական փորձարկման և ախտորոշման համար: